پیشینه تحقیق مورفولوژی و ساختار انگل توکسوپلاسما گوندی و راه انتقال و واکسیناسیون و تشخیص توکسوپلاسموز و درمان آن دارای ۶۱  صفحه می باشد فایل پیشینه تحقیق به صورت ورد  word و قابل ویرایش می باشد. بلافاصله بعد از پرداخت و خرید لینک دنلود فایل نمایش داده می شود و قادر خواهید بود  آن را دانلود و دریافت نمایید . ضمناً لینک دانلود فایل همان لحظه به آدرس ایمیل ثبت شده شما ارسال می گردد.

فهرست مطالب

تاریخچه و طبقه بندی    ۶
مورفولوژی و ساختار انگل    ۷
تاکی زوایت (اندودیوزوایت)    ۷
برادی زوایت (سیستی زوایت)    ۱۱
اسپوروزوایت    ۱۲
تغییر اشکال مختلف توکسوپلاسما به یکدیگر و نقش آن در بیماری زایی توکسوپلاسما    ۱۳
۱-۱- اتصال و نفوذ توکسوپلاسما گوندی به سلول    ۱۴
۱-۲-راه انتقال :    ۱۵
۱-۲-۱-مصرف مواد انگل آلوده به اووسیست    ۱۶
۱-۲-۲-مصرف گوشت حاوی کیست نسجی    ۱۷
۱-۲-۳-انتقال از طریق جفت    ۱۷
۱-۳- همه گیر شناسی عفونت توکسوپلاسمایی :    ۱۸
۱-۳-۱-عوامل موثر در همه گیر شناسی توکسوپلاسما گوندی :    ۱۹
۱-۳-۱-۱-عوامل مربوط به انگل :    ۲۰
۱-۳-۱-۲-عوامل مربوط به میزبان :    ۲۰
۱-۳-۱-۳-عوامل مربوط به محیط :    ۲۱
۱-۴-آنتی ژنهای توکسوپلاسما گوندی :    ۲۱
۱-۵-واکسیناسیون :    ۲۲
۱-۶- بیماریزایی :    ۲۳
۱-۷-توکسوپلاسموزیس مادرزادی    ۲۵
۱-۸-تظاهرات بالینی    ۲۷
۱-۹-تشخیص توکسوپلاسموز    ۳۱
۱-۹-۱- تشخیص مستقیم    ۳۱
۱-۹-۱-۱-تشخیص هیستولوژی (بافت شناسی)    ۳۱
۱-۹-۱-۲- جداسازی توکسوپلاسما گوندی    ۳۲
۱-۹-۱-۳-تکنیک واکنش زنجیری پلیمراز (PCR)    ۳۲
۱-۹-۲-تشخیص غیر مستقیم    ۳۳
۱-۹-۲-۱- تست رنگی سابین – فلدمن    ۳۶
۱-۹-۲-۲- سنجش آنتی بادی فلوئورسنت غیر مستقیم    ۳۶
۱-۹-۲-۳- تست سنجش آگلوتیناسین ایمنوسوربنت    ۳۷
۱-۱۰-الایزا (ELISA)    ۳۷
۱-۱۰-۱- الایزای مستقیم    ۳۷
۱-۱۰-۲- الایزای غیر مستقیم    ۳۸
۱-۱۰-۳- الایزای ساندویچ    ۳۸
۱-۱۰-۳-۱-الایزای ساندویچ مستقیم    ۳۹
۱-۱۰-۳-۲-الایزای ساندویچ غیر مستقیم    ۳۹
۱-۱۰-۴- الایزای رقابتی یا مهاری    ۳۹
۱-۱۱-کاربرد پروتئین های نوترکیب در تشخیص توکسوپلاسماَ    ۴۰
۱-۱۲-تولید پروتئین نوترکیب    ۴۱
۱-۱۳-تشخیص سرولوژی توکسوپلاسموزیس در دوران حاملگی    ۴۱
۱-۱۴- ارزش تشخیصی ایزوتایپ های مختلف ایمونوگلوبولین اختصاصی توکسوپلاسما در تشخیص عفونت    ۴۲
۱-۱۵-کاربرد IgGAvidity در افتراق عفونت حاد از مزمن توکسوپلاسموزیس    ۴۴
۱-۱۶- درمان    ۴۶
۱-۱۷-پیشگیری    ۴۹
۲-۱-مروری بر تحقیقات گذشته    ۵۰
منابع    ۵۶

منابع

Ajioka,J.,Fitzpatrick,J.,Reitter,C.,2001,Toxoplasma gondii genomics: shedding light on pathogenesis and chemotherapy,Cambridge University Press, P.1462-1482.

Aubert,D.,Maine,G.,Ville,n.,2000,Recombinant antigens to detect Toxoplasma gondii-specific immunoglobulin G and immunoglobulin M in human sera by enzyme immunoassay,J Clin Microbiol,Vol.38,No.3,P.1144–۱۱۵۰٫

Ambroise-Thomas,P.,Garin,J.,Rigaud,A.,1966,Improvement of a immunofluorescence technique by the use of counterdyes Application to Toxoplasma gondii,Press Med,Vol.74,No.23,P.2215-2216.

Beattie, C.,P 1988,Toxoplasmosis of animals and man, General Biology, Florida CRC Press,Vol.1,No.11,.P. 1-35.

Beghetto,E.,Bufollano,W.,Spadoni,A.,2003,Use of an immunoglobulin G avidity assay based on recombinant antigens for diagnosis of primary Toxoplasma gondii infection during pregnancy,J Clin Microbiol,Vol.41,No.12,P.5414–۵۴۱۸٫

Beghetto,E.,Spadoni,E.,Bruno,E.,Buffolano,W.,Gargano,N.,2006,Chimeric antigens of Toxoplasma gondii: Toward standardization of Toxoplasmosis serodiagnosis using recombinant products,J Clin Microbiol,Vol.44,No.6,P.2133–۲۱۴۰٫

Beghetto,E.,Spadoni,A.,Buffolano,W.,2003,Molecular dissection of the human B-cell response against Toxoplasma gondii infection by lambda display of cDNA libraries, J Parasitol,Vol.33,No.24,P.163–۱۷۳٫

Chen,X., Liu,G., Xu,F.,Wang, X., Jiang,J.,1994, Amplification,cloning, sequencing and expression of the gene encoding the major surface antigen of Toxoplasma gondi isolated in China,J Med Coll PLA,Vol.9,No.6,P.98-101.

Dalgýç,N., 2008, Congenital Toxoplasma gondii infection, reviews, Marmara Medical Journal,Vol. 21,No.1,P. 89-101.

Dubey,J.,Lindsay,D.,Speer,A., 1998. Structures of Toxoplasma gondii tachyzoites, bradyzoites, and sporozoites and biology and development of tissue cysts,Clinical microbiology rev,Vol.2,No.11,P. 267-299.

Eaton,M.,Weiss,L.,Kim,K.,2006,Cyclic nucleotide kinases and tachyzoite-bradyzoite transition in Toxoplasma gondii,International Journal for Parasitology,Vol.36,P.107-114.

Engvall,E.,Perlmann,P.,1972,Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA, Quantitation of specific antibodies by enzyme-labeled anti-immunoglobulin in

antigen coated tubes,Immunol,Vol.109,No.13,P.129-135.

Ferrandiz,J.,Mercier,C.,Wallon,M.,2004,Limited value of assays using detection of immunoglobulin G antibodies to the two recombinant dense granule antigens, GRA1 and GRA6 Nt of Toxoplasma gondii, for distinguishing acute and chronic infection in pregnant women,Clin Diagn Lab Immunol,Vol.11,No.4,P.1016-1021.

Golkar,M.,Azadmanesh,K.,Khalili,G.,2008,Serodiagnosis of recently acquired Toxoplasma gondii infection in pregnant women using enzyme-linked immunosorbent assays with a recombinant dense granule GRA6 protein, Diagnostic Microbiology and Infectious Disease,Vol.61,No.34,P.31–۳۹٫

Golkar,M.,Rafati,S.,Abdel-Latif,M.,2007,The dense granule protein GRA2, a new marker for the serodiagnosis of acute Toxoplasma infection,Diagnostic Microbiology and Infectious Disease,Vol.58,No.32,P.419–۴۲۶٫

  تاریخچه و طبقه بندی

انگل توکسوپلاسما گوندی[۱]، یکی از اعضای شاخه اپی کمپلکسا، راسته کوکسیدیا، انگل اجباری درون سلولی بوده که بیماری توکسوپلاسموزیس را ایجاد می کند.این انگل با گسترش جهانی، قادر به تکثیر در بسیاری از میزبان های مهره دار از جمله انسان است. این ارگانیسم در سال ۱۹۰۸ توسط نیکول و مانسو[۲] در یک جونده کوچک به نام کتنوداکتیلوس گوندی[۳] در انستیتو پاستور تونس و تقریباً به طور همزمان توسط اسپلندور[۴] در برزیل در یک خرگوش آزمایشگاهی کشف شد. ابتدا تصور می شد این ارگانیسم گونه ای از جنس لیشمانیا  است ولی یک سال بعد، پس از مطالعات بیشتر آن را به عنوان یک ارگانیسم متفاوت شناختند و نام جنس جدید توکسوپلاسما را برای آن پیشنهاد کردند)۱و۲(. اگرچه توکسوپلاسما گوندی عوارض متعددی در انسان بوجود می آورد ولی ۱۵ سال بعد از کشف آن بود که انگل از اتوپسی چشم یک کودک مبتلا به هیدروسفالی جدا شد)۳و۴(. شیوع توکسوپلاسموزیس تا قبل از ابداع روش تشخیص سرولوژیکی تست رنگی[۵] به وسیله سابین و فلدمن[۶] در ۱۹۴۸ )۵(، به طور دقیق  مورد ارزیابی قرار نگرفت. فرنکل[۷] در سال ۱۹۷۰ چرخه زندگی را به طور کامل شناسایی و معرفی کرد )۱(. موقعیت تاکسونومیک توکسوپلاسما گوندی بر اساس خصوصیات شکل شناسی و چرخه انگلی آن به وسیله ملهورن[۸] در سال ۱۹۸۸ به صورت زیر تعریف شده است.

Kingdom: Protozoa

Phylum: Apicomplexa

Class: Sporozoea

 Sub-class: Coccidia

Super- order: Eucoccidea

Order: Eucoccidida

Sub- order: Eimeriina

Family: Eimeriidae

Genus: Toxoplasma

Species: gondii

مورفولوژی و ساختار انگل

توکسوپلاسما از دو کلمه توکسون به معنای کمان یا قوس و پلاسما به معنای سلول مشتق شده است، زیرا ارگانیسم شکل هلالی یا قوسی دارد. انگل دارای سه شکل در چرخه زندگی می باشد:

۱-تاکی زوایت ۲-برادی زوایت ۳-اسپوروزوایت

تاکی زوایت (اندودیوزوایت)

تاکی زوایت شکل آزاد انگل و مربوط به مرحله تکثیر سریع آن است که قوسی شکل، به طول ۴-۸ وعرض۲-۴ میکرومتر می باشد. در عکس های حاصل از میکروسکوپ الکترونی سیستم پیچیده ای از اندامک ها شامل غشاء نازک پوشش خارجی[۱]، حلقه قطبی[۲]، یک مخروط تقریباً تو خالی و بدون رأس به نام کونوئید[۳] در انتهای نوک تیز (قدامی)، روپتری ها[۴]، میکرونم ها[۵]، میتوکندری ها[۶]، میکروتوبول های زیر غشایی[۷]، رتیکولوم آندوپلاسمی صاف و خشن[۸]، دستگاه گلژی[۹]، ریبوزومها[۱۰]، یک ارگانل شبیه پلاستید به نام آپیکوپلاست[۱۱] و میکروپور[۱۲] و هسته کاملاً مشخص را مشاهده کرد. )۴( (شکل۱-۱). معمولاً هسته در جهت انتهای خلفی یا در ناحیه مرکزی سلول قرار گرفته است. کروماتین به طور انبوه در تمامی هسته پخش شده و معمولاً هستک[۱۳] در مرکز هسته جا دارد. کروموزوم ها طی میتوز متراکم نمی شوند، بنابراین، تعداد کروموزوم ها که ۱۱ عدد  می باشد ، اولین بار با استفاده از PFGE[14] شناسایی شده است )۹(. در مقاطع هیستولوژی تاکی زوایت ها اغلب تخم مرغی شکل می باشند )۱(. تاکی زوایت ها به شرایط محیطی خیلی حساسند و معمولاً در خارج بدن میزبان سریعاً از بین می روند )۶(. تاکی زوایت با هجوم فعالانه به غشاء سلول میزبان و یا به وسیله فاگوسیتوز وارد سلول میزبان می گردد. ابتدا انتهای کونوئید نفوذ نموده ، کونوئید به طرف جلو فرورفته و غشاء روپتری با غشاء واحد در انتهای خلفی توکسوپلاسما گوندی در آمیخته، و سوراخی را تشکیل داده که از طریق آن ترشحات روپتری آزاد می گردد. احتمالاً محتویات روپتری ها غشای پلاسمائی سلول میزبان را در اطراف انتهای قدامی توکسو پلاسما گوندی حل می نماید. زمانی که توکسوپلاسما گوندی وارد سلول میزبان می شود، غشای پلاسمائی پاره شده و گروهی از حفرات ریز یا وزیکول ها (احتمالاً ترشحات روپتری) در نواحی مجاور سیتوپلاسم دیده می شود. غشاء سلول میزبان تنها در انتهای قدامی توکسوپلاسما گوندی پاره می شود. در طی ۱۵ ثانیه انگل در ماکروفاژ دیده شده، و دخول آن به وسیله فاگوسیتوز ۱۲۰ ثانیه به طول می انجامد. به فاصله کوتاهی پس از نفوذ ، توکسوپلاسما گوندی به وسیله حفره یا واکوئل حامل انگل[۱۵] (PV) از سلول میزبان مجزا می شود. به نظر می رسد PV به طور دو جانبه از انگل و میزبان مشتق شده باشد )۸(. تاکی زوایت به طریق غیر جنسی به وسیله آندودیوژنی[۱۶] مکرر در درون سلول میزبان تکثیرمی یابد (شکل۱-۳). آندودیوژنی شکل اختصاصی تقسیم بوده که در خلال آن دو سلول دختر تشکیل شده و سلول مادری تحلیل می رود. تقسیم تاکی زوایت ها به طریق آندودیوژنی تا پر شدن سلول میزبان از انگل ها ادامه می یابد. سلول های میزبان که حاوی تاکی زوایت های متعدد هستند، کلون ها، کلنی های نهایی یا پزودوسیست[۱۷] (کیست کاذب) نامیده می شوند. ندرتاً انگل های یک گروه به طور همزمان تقسیم شده، به طوری که معمولاًسلول های پروژنی به طور تصادفی یا بی قاعده مرتب می شوند. با این وجود، گاهی ممکن است تقسیم همزمان پروژنی انجام شده و توده رُز مانند تشکیل گردد. گروهی از تاکی زوایت هایی که به وسیله یک PV احاطه شده، کلون نامیده می شوند ) ۸و۴( . تاکی زوایت های توکسوپلاسما فاقد اندامهای حرکتی مانند تاژک ، مژه یا پای کاذب بوده و حرکت ارگانیسم با تا شدن بدن یا لغزیدن تواءم با چرخش در حول محور طولی بدن ، انقباض یا موج دار شدن انجام می گیرد(۸و۱۰). در مراحل اولیه عفونت توکسوپلاسمایی یا مرحله حاد بیماری ممکن است گروههایی از تاکی زوایت های در حال تکثیر در سیتوپلاسم سلولهای انواع بافتها مشاهده گردند که به مجموعه تاکی زوایت های داخل سلول میزبان کیست کاذب یا کلنی نهایی یا تجمعات انتهایی[۱۸] اطلاق می شود(۸و۱۰).این کلنی های تاکی زوایتی را می توان بر اساس تفاوت در رنگ پذیری از ارگانیسم های موجود در کیستهای حقیقی توکسوپلاسما متمایز نمود. شکل تاکی زوایت انگل در مرحله حاد عفونت دیده می شود و می تواند تمام سلولهای نسوج پستانداران را مورد حمله قرار دهد . پس از حمله ، انگل هر ۴ تا ۶ ساعت یک بار تکثیر می یابد و تجمعات شبیه به به آرایش گل تشکیل می دهد و سر انجام در هر سلول آلوده ۱۶-۸ و در مواردی تعداد بیشتری تاکی زوایت تجمع می یابد. سر انجام سلول با تعداد ۶۴ تا ۱۲۴ انگل پر شده و سپس سیتوپلاسم انباشته از تاکی زوایت سلول پاره می شود و ارگانیسم های آزاد شده به سلولهای مجاور حمله می کنند و در آنها به شیوه اندودیوژنی تکثیر می یابند(۱۱).همچنین تاکی زوایت های آزاد شده از طریق جریان خون به بافت های متعددی از جمله سیستم اعصاب مرکزی ، چشم ،عضلات اسکلتی و قلبی راه یافته و سلولهای بافتی را آلوده می کنند. تکثیر انگل باعث ایجاد یک پاسخ التهابی شدید و تخریب بافت شده و بنابر این منجر به تظاهرات بالینی بیماری می گردد(۱۱).

برادی زوایت (سیستی زوایت)

ماحصل سیکل غیر جنسی انگل در میزبان است که انگل در نسوج میزبان به صورت کیستی در می آید. اندازه آن بین ۱۲۰-۲۰ میکرومتر متغیر است )۱(. کیست نسجی در واقع مرحله در حال استراحت[۱] انگل در بدن میزبان است  این کیست ها در حقیقت مجموعه ای از برادی زوایت ها ی انگلی هستند که دارای جدار کیستی نازک می باشند(برادی در زبان یونانی به معنای کند و آرام ). برادی زوایت نیز توسط تقسیم دوتایی آندودیوژنی تکثیر می شود که بر خلاف تاکی زوایت به کندی صورت می گیرد )۱۲(. تاکی زوایت تحت تأثیر فشار پاسخ ایمنی به برادی زوایت تبدیل می شود و تشکیل کیست می دهد. کیست های بافتی حاوی صدها و هزاران برادی زوایت می باشند. برادی زوایت های داخل کیست ها مادام العمر در میزبان باقی می مانند )۱۱(. از نظر ساختاری برادی زوایت و تاکی زوایت اندکی متفاوت هستند . در برادی زوایت ها هسته در جهت انتهای خلفی قرار دارد. برادی زوایت باریک تر از تاکی زوایت بوده و در محتوای بالای میکرونم ها و گرانول های آمیلوپکتین (منبع انرژی) با تاکی زوایت متفاوت است )۸و۱۲(. دانه های لیپیدی در برادی زوایت دیده نمی شوند ولی گاهاً در تاکی زوایت دیده می شوند. در حضور آنزیم های پروتئولیتیک، برادی زوایت ها ۱-۲ ساعت پایدار می مانند ولی تاکی زوایت ها در مدت ۱۰ دقیقه از بین می روند. در گربه که میزبان نهایی است، دوره کمون عفونت زایی (فاصله بین عفونت اولیه تا دفع اووسیست ها) برای برادی زوایت کوتاهتر از تاکی زوایت است )۱۲(. علاوه بر سرعت همانند سازی، برادی زوایت ها وتاکی زوایت ها در بیان ژن و متابولیسم نیز متفاوت هستند. بیان بعضی ژن ها اختصاصی مرحله تاکی زوایت یا برادی زوایت می باشد. همچنین متابولیسم در برادی زوایت کندتر است.

اسپوروزوایت

از نظر شکل شناسی بسیار نزدیک به تاکی زوایت می باشد. در بررسی میکروسکوپ الکترونی نیز بسیار مشابه تاکی زوایت است، جز اینکه میکرونم ها و روپتری فراوانی در اسپور زوایت وجود دارد. روپتری ها یا متراکم هستند (در برادی زوایت) یا پراکنده هستند (در تاکی زوایت). اسپوروزوایت همانند برادی زوایت، تعداد بسیار زیادی گرانول های متراکم دارد.  اسپوروزوایت شکلی از انگل است که مسئول تکثیر جنسی توکسوپلاسما گوندی در گربه (میزبان نهایی) می باشد و اووسیت ها را به وجود می آورد که قطر ۱۰ تا ۱۲ میکرومتر دارند و شکل مقاوم انگل به محیط بیرونی هستند و در مدفوع گربه دفع می شوند. اسپورولاسیون یک اووسیت تولید دو اسپوروسیت می کند که هر کدام حاوی دو اسپوروزوایت هستند )۱۴(.

 تغییر اشکال مختلف توکسوپلاسما به یکدیگر و نقش آن در بیماری زایی توکسوپلاسما

مشخصه عفونت اولیه و بیماری حاد، حضور تاکی زوایت های سریع تکثیر شونده می باشد. حدود ۱۰ تا ۱۴ روز بعد از عفونت، تاکی زوایت ها به برادی زوایت ها تمایز می یابند که خیلی آهسته تر تکثیر می شوند و در سراسر بدن تشکیل کیست می دهند. کیست های بافتی مدت زیادی باقی می مانند و باعث بیماری نمی شوند. در افراد مبتلا به نقص سیستم ایمنی مثل AIDS و بدخیمی ها، پاره شدن کیست های بافتی و تغییر شکل برادی زوایت به تاکی زوایت منجر به فعال شدن مجدد بیماری می شود. افراد مبتلا شده از طریق انتقال مادر به نوزاد نیز در معرض خطر فعال شدن مجدد بیماری هستند که می تواند چندین بار تکرار شود و بیشتر مغز و چشم های آنها را مبتلا می کند )۲(. تغییر شکل تاکی زوایت ها به برادی زوایت ها و بالعکس، نه تنها نقش حیاتی در ایجاد عفونت مزمن دارد بلکه مسئول فعال شدن مجدد بیماری نیز می باشد. فهم این فرایند می تواند همچنین در طراحی داروهای شیمیایی جدید که قادر به از بین بردن کیست های بافتی باشند، کمک کند. همچنین شناسایی مولکول های سطحی اختصاصی هر مرحله (تاکی زوایت یا برادی زوایت) می تواند منجر به یافتن واکسن های مؤثر یا پیشنهاد راه هایی برای جلوگیری از تهاجم انگل منجر شود )۸و۱۴(.

۲۷  Resting Stage

۹  Pellicle

۱۰  Polar ring

۱۱  Conoid

۱۲  rhoptries

۱۳  Micronemes

۱۴  mitochondrio

۱۵ subpellicular microtubules

۱۶  rough and  smooth endoplasmic reticulum

۱۷ Golgi Complex

۱۸ ribosomes

۱۹  apicoplast

۲۰  micropore

۲۱ Nucleulus

۲۲  Pulse field gel electrophoresis

۲۳  Parasitophorous vacuole

۲۴  Endodyogeny

۲۵  Pseudo Cyst

۲۶  Terminal colony

[۱] Toxoplasma gondii

[۲] Nicolle & Manceaux

[۳] Ctenodactylus gondii

[۴] Splendour

^۵  Dye Test

[۶] Sabin & Feldman

[۷] Frenkel

[۸] Mehlhorn

تمامی فایل های پیشینه تحقیق و پرسشنامه و مقالات مربوطه به صورت فایل دنلودی می باشند و شما به محض پرداخت آنلاین مبلغ همان لحظه قادر به دریافت فایل خواهید بود. این عملیات کاملاً خودکار بوده و توسط سیستم انجام می پذیرد. جهت پرداخت مبلغ شما به درگاه پرداخت یکی از بانک ها منتقل خواهید شد، برای پرداخت آنلاین از درگاه بانک این بانک ها، حتماً نیاز نیست که شما شماره کارت همان بانک را داشته باشید و بلکه شما میتوانید از طریق همه کارت های عضو شبکه بانکی، مبلغ  را پرداخت نمایید.